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斐林试剂和双缩脲试剂的成分相同，但二者的使用方法及原理不尽相同。斐林试剂和班氏试剂都是检验还原性糖的试剂，二者的使用方法及原理、成分也有区别，下面就从这几种试剂的使用原理、成分及使用方法等方面做一简单总结。

1. 斐林试剂和双缩脲试剂

斐林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO₄溶液组成，但二者有如下三点不同：

(1)溶液浓度不同

斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g·mL－1，CuSO₄溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g·mL－1；双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g·mL－1，CuSO₄溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g·mL－1。

(2)使用原理不同

斐林试剂是新配制的Cu(OH)₂溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu₂O沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu^2＋与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H₂NOC－NH－CONH₂)结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。

(3)使用方法不同

斐林试剂使用时，先反NaOH溶液和CuSO₄溶液混合(将滴CuSO₄溶液滴入2mL NaOH溶液中)，而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液(2mL)，振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴CuSO₄溶液，振荡摇匀后观察现象。

2. 斐林试剂和班氏试剂

关于斐林试剂和班氏试剂，可用下面的例题引出其异同点：例：你可用什么方法，检验人的尿液中是否含有糖？

答案：

方法一：在试管中加入人的尿液0.1mL，加入班氏糖定性试剂1mL，混合均匀后，将试管放入盛有开水的烧杯中，加热煮沸1min~2min，若试管中溶液在加热后产生了砖红色沉淀，说明尿液中含有糖。

方法二：取少许尿液加水稀释后，加入刚配制好的斐林试剂，沸水浴加热后，若出现砖红色沉淀，则说明尿液中含有糖。

方法三：取少许尿液加水稀释后，加入少许Cu(OH)₂悬浊液(新制)加热，若出现砖红色沉淀，则说明尿液中含有糖。

因斐林试剂实质上是新配制的Cu(OH)₂溶液，所以方法二与方法三的实质是相同的，只是说法不同而已。

由以上例题可以看出，斐林试剂和班氏试剂都能用于鉴定可溶性还原糖(上题中检验的是葡萄糖)的存在，二者有相同点，也有不同点。

二者的不同点，可以归纳为以下几点：

(1)班氏试剂常用于尿糖的鉴定，其配方与斐林试剂不一样，其配方为：

①400mL 水中加85g 柠檬钠和50g 无水碳酸钠；

②50mL 加热的水中加入8.5g 无水硫酸铜。制成CuSO₄溶液；

③把CuSO₄溶液倒入柠檬酸钠－Na₂CO₃溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。

(2)其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成Cu(OH)₂'Cu(OH)₂和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中Cu(OH)₂的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH^－，与柠檬酸钠－Na₂CO₃溶液和CuSO₄溶液混合时，Cu^2＋结合，生成Cu(OH)₂'Cu(OH)₂与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。

(3)两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生Cu(OH)₂'Cu(OH)₂很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠－Na₂CO₃为一对缓冲物质，产生的OH^－数量有限，与CuSO₄溶液混合后产生的浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。

当然，无论用班氏试剂还是斐林试剂，归根结底都是Cu(OH)₂与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的Cu₂O沉淀，两者反应现象一样，这就是二者的相同之处。